作者:顧佳琴
《中華人民共和國藥典》2020年版四部中規(guī)則:常用的滅菌方法有干冷滅菌法、干熱滅菌法、輻射滅菌法、氣體滅菌法、過濾除菌法、汽相滅菌法、液相滅菌法??梢罁?jù)被滅菌物品的特性采用一種或多種方法組合滅菌。嚴(yán)厲的滅菌操作十分重要,會影響整個實(shí)驗(yàn)?zāi)芊耥樌恼归_,筆者依據(jù)日常實(shí)踐操作狀況選擇了相順應(yīng)的滅菌方法停止操作,并對其方法停止了匯總?cè)缦拢?/p>
一、干冷滅菌
經(jīng)過熱蒸汽或沸水使細(xì)菌蛋白質(zhì)、核酸變性而殺滅微生物的方法。
分為三種:
1、煮沸滅菌:加熱使水至沸而殺滅細(xì)菌的方法。凡不適于高壓蒸汽滅菌的物品可常壓下在水中煮沸一段時間到達(dá)滅菌目的。
2、流通蒸汽滅菌:常壓下,用蒸籠、蒸鍋等在100℃滅菌。僅可殺死細(xì)菌繁衍體,不能完全殺滅芽孢。
3、高壓蒸汽滅菌:經(jīng)過加壓提高蒸汽溫度,穿透力強(qiáng)、溫度高、滅菌效果*好。是*牢靠*適用*普遍的滅菌方法,普通采用121℃高壓滅菌15~20min或許116℃高壓滅菌30min。培育基、膠塞、玻璃器材等凡耐高平和濕潤的物品可運(yùn)用本法滅菌。滅菌時,容器不可密封,需與滅菌鍋內(nèi)空氣流通。完全排出高壓滅菌器內(nèi)的冷空氣。(冷空氣存在時,同一表壓下所到達(dá)的溫度值偏低,不契合規(guī)則的要求,滅菌就不徹底)。
二、干熱滅菌
應(yīng)用熱空氣傳遞或高溫灼燒停止的滅菌,殺死微生物和芽孢。
分為二種:
1、灼燒主要用于接種工具滅菌,如接種針、接種環(huán)、刀、剪、等在火焰上炙烤即可到達(dá)徹底滅菌。將試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等在火焰旁停止無菌操作,應(yīng)用火焰對管口等停止滅菌,防止管口污染,作為無菌操作進(jìn)程中的輔佐滅菌手腕。
2、干熱空氣滅菌是應(yīng)用熱輻射及干熱空氣停止滅菌,普通運(yùn)用于金屬物品、玻璃器材等不能與蒸汽接觸的物品滅菌,須在160℃~170℃左右堅(jiān)持恒溫2~3小時。
三、紫外線滅菌
應(yīng)用紫外燈停止輻射滅菌??梢詫ξ⑸锏鞍踪|(zhì)的破壞使其滅活。
1、在實(shí)踐操作中,無菌室內(nèi)的污染任務(wù)臺、生物平安柜、傳遞窗等裝置紫外燈。普通僅起殺死空氣中、物體外表、空中等局部微生物的作用,紫外線輻射的穿透力很弱,而不能起到完全滅菌的作用。
2、紫外線消毒方法驗(yàn)證中紫外燈需確認(rèn)的參數(shù)主要有紫外線的波長、紫外線強(qiáng)度、燈管的壽命。
3、紫外燈消毒的效果與紫外線強(qiáng)度、照射時間、溫度與濕度等要素有關(guān),還需經(jīng)過驗(yàn)證來確定。
4、紫外線直射對眼、皮膚有損害。紫外線照射進(jìn)程中發(fā)生臭氧,臭氧過多對眼及鼻腔有撫慰,發(fā)生頭暈、胸悶、血壓降低,所以無菌室及污染任務(wù)臺紫外線照射中止后,請稍等片刻,讓臭氧流失,方可停止實(shí)驗(yàn)操作。
四、除菌過濾
以物理的方法除去介質(zhì)中的微生物。常將空氣或液體中的微生物及雜質(zhì)用不同資料制成的薄膜濾器過濾失掉無菌、無雜質(zhì)的空氣或液體。
濾過細(xì)菌的濾膜孔徑為0.22μm(或更小孔徑或相反過濾效能)。
總結(jié):在檢驗(yàn)進(jìn)程中,無論采用什么方法,都應(yīng)思索到原有成分的動搖性和平安性,對滅菌條件除了要求經(jīng)濟(jì)性、環(huán)保性和滅菌徹底外,還要必需保證被滅菌物質(zhì)成分不被破壞。不影響物品的質(zhì)量。
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