造模成功后會逐漸出現(xiàn)跖肌步態(tài)、后爪在運動時的旋轉(zhuǎn)運動、腳趾間隙的擴大、髖膝踝的過度運動、不穩(wěn)定軀干運動、前后肢不協(xié)調(diào)運動、不能支持體重等癥狀。

本實驗采用健康成年SPF級老鼠。飼料墊料均為高壓滅菌產(chǎn)品，購自北京維通利華實驗動物有限公司，動物用水均經(jīng)過除菌處理。實驗動物以完整的包裝直接進入實驗室，觀察適應(yīng)5天后無異常情況，方進行實驗。實驗過程中動物操作均符合動物倫理學規(guī)范，對環(huán)境和生態(tài)影響等符合國家相關(guān)法律規(guī)定。

不同程度的神經(jīng)細胞的壞死，以及隨之而來的神經(jīng)元的減少及白質(zhì)的脫髓鞘現(xiàn)象。

250-330g重的大鼠，將后枕頸區(qū)剃光后，在脖子后方正中切開皮膚，打開一個縱切口，顯微鏡下切除黃韌帶暴露脊柱后方從第三頸椎（C3）到第六椎體（C7）椎板。切除C4或C5或C6的椎板以暴露脊髓。使一個10g重的金屬桿沿一套管垂直落下，從5mm高處下降，落在暴露的脊髓節(jié)段表面而致傷。

Katz[1]等在20世紀80年代早期開始慢性應(yīng)激模型的研究，連續(xù)三周給予動物一系列高強度刺激因素如電擊、冰水游泳等，動物呈現(xiàn)抑郁狀態(tài)。Willner[2]等在此基礎(chǔ)上，降低了應(yīng)激刺激的強度，延長應(yīng)激時間，并將快感缺失測試作為該模型的主要評價方法，形成了慢性不可預測性溫和應(yīng)激模型（CUMS）。應(yīng)激因子包括晝夜節(jié)律的調(diào)整和光照性質(zhì)的改變( 閃光、間斷光照)、食物和飲水的調(diào)整、環(huán)境的改變( 鼠籠傾斜、潮濕墊料、高溫、噪音、束縛、電擊足底、游泳等。應(yīng)激因子的多變性和不可預測性是模型制造成功的關(guān)鍵。該模型被廣泛用于抑郁癥神經(jīng)生物學機制及抗抑郁藥物的研究，以及伴發(fā)的焦慮、學習記憶障礙及防護藥物研究。研究發(fā)現(xiàn)，CUMS能夠造成小鼠空間學習記憶障礙[3]。

因此，本研究聚焦于CUMS對老鼠學習記憶的影響，采用Morris 水迷宮檢測慢性應(yīng)激對大鼠依賴性空間學習記憶能力的影響；采用避暗行為學檢測慢性應(yīng)激對小鼠記憶的獲得、鞏固、再現(xiàn)等過程。慢性應(yīng)激對于Morris 水迷宮的影響，研究報道不盡一致。有研究發(fā)現(xiàn)慢性應(yīng)激可損傷大鼠的空間學習記憶功能[4]。有報道認為，慢性應(yīng)激可促進動物在Morris 水迷宮測試中的學習記憶功能[5]。本研究采用Morris 水迷宮檢測慢性應(yīng)激對大鼠空間學習記憶能力的影響。避暗實驗是利用嚙齒類動物趨暗避明的習性設(shè)計，動物進入暗室即遭足底電擊，反復數(shù)次后形成條件反射[6]。這種厭惡性條件反射形成快且恐懼記憶持續(xù)時間長，是較為敏感的學習記憶評價方法。本研究利用避暗實驗評價CUMS 小鼠模型的認知功能損傷。

目前，文獻報道的CUMS刺激因子刺激因子的多變性、不可預見性是模型成功的關(guān)鍵，單獨使用一種刺激不能產(chǎn)生理想的效果，每種刺激因子應(yīng)間隔3～7 d[7]，大部分CUMS造模過程都選擇了7-11種刺激因子，只有少數(shù)實驗選擇了≥12或≤6種的刺激因子，最少的用了4種，最多的用了14種。造模周期有2-8周不等，其中以3-6周最為常見。本模型選用適宜的造模時間-35天，以及常用的幾種刺激因子，確定該模型誘導的認知障礙模型為現(xiàn)代人類長期處于慢性不可預測應(yīng)激作用下誘發(fā)的學習記憶減退機理研究、防護和藥物研究提供實驗?zāi)Ｐ汀?/p>

參考文獻：

[1] KATZ R.Animal model of depression: pharmacological sensitivity of a hedonic deficit[J]. Pharmacol Biochem Behav, 1982, 16(6): 965-8.

[2] WILLNER P.Validity, reliability and utility of the chronic mild stress model ofdepression: a 10-year review and evaluation [J]. Psychopharmacology (Berl),1997, 134(4): 319-29.

[3] 瞿禮萍, 曾南, 梁珂, 等. 逍遙散對慢性溫和應(yīng)激模型小鼠行為學及空間學習記憶能力的影響[J]. 中藥藥理與臨床, 2007,23(5):18-21.

[4] CUADRADO-TEJEDOR M, RICOBARAZA A,DEL RIO J, et al. Chronic mild stress in mice promotes cognitive impairment andCDK5-dependent tau hyperphosphorylation [J]. Behav Brain Res, 2011, 220(2): 338-43.

[5] GOUIRAND A M, MATUSZEWICH L. Theeffects of chronic unpredictable stress on male rats in the water maze [J].Physiology & Behavior, 2005, 86(1-2): 21-31.

[6] SHULZ D,CHERNICHOVSKY D, ALLWEIS C. A novel method for quantifying passive-avoidance behaviorbased on the exponential distribution of step-through latencies [J]. PharmacolBiochem Behav, 1986, 25(5): 979-83.

[7] Willner P．Chronic mildstress ( CMS) revisited: Consistency and behavioural-neurobiologicalconcordance in the effects of CMS[J]. Neuropsychobiology，2005, 52(2) :90-110．