原理：

聚丙烯酰胺凝膠電泳是以聚丙烯酰胺凝膠為載體停止電泳的方法。核糖核酸(ribonucleicacid,RNA)分子在一定pH值的緩沖液中帶有電荷,將其放人電場中，則可向與其所帶電荷電性相反的電極移動。聚丙烯酰胺凝膠具有分子篩效應(yīng)，核酸分子大小、外形不同，故在電場作用下,核酸分子在聚丙烯酰胺凝膠中泳動速度不同,依此可到達(dá)分別純化的自的。本文詳細(xì)引見了RNA的聚丙烯酰胺凝膠電泳，包括聚丙烯酰胺凝膠電泳的原理，實(shí)驗(yàn)所需試劑，實(shí)驗(yàn)步驟。

資料、儀器設(shè)備及試劑

(一)資料

RNA樣品液。

(二)儀器設(shè)備

電泳儀,玻璃管,試管架,穿刺針頭,注射器。

(三)試劑

(1) 20%的單體母液:取重結(jié)晶的丙烯酰胺19.0g及甲叉雙丙烯酰胺1.0g,蒸餾水溶解,稀釋至100mL。

(2) Tris-硼酸一EDTA(TBE)緩沖液:稱Tris 108.8 g,硼酸55.0g, EDTA -Na29.3g蒸餾水溶解,稀釋至1000mL,pH為8.3。用于電極緩沖液時再稀釋10倍。

(3) β一DMAPN(二甲基氨基丙腈)。

(4) 1.6%過硫酸銨溶液:稱取0.16 g過硫酸銨溶于10 ml.水中。

(5) 20%蔗糖-0.2%溴酚藍(lán)溶液:取蔗糖20g,溴酚藍(lán)0.2 g溶子100 mL水中。

(6) 0.2%甲烯藍(lán)染液:取0.2 g甲烯藍(lán)溶于100 mL pH4.7的0.4 mol/L HAc緩沖液中,過濾后運(yùn)用。

(7) 6%HAc液:取HAc 60 mL加水至1 000 mL。

RNA的聚丙烯酰胺凝膠電泳實(shí)驗(yàn)步驟：

(一)制膠

(1)取玻管(8 cmx0.5 cm)2支,下端用膠布封鎖管口,垂直立在試管架上。

(2)取單體母液3 mL、緩沖液1.5 mL、β- DMAPN0.06 mL、水10 mL混勻,再加過硫酸銨0.94mL,混勻后立郎分裝于各管至刻度處，沿玻管加幾滴水封面，靜置待凝結(jié)。

(二)加樣

(1)取大批RNA樣品液和RNA規(guī)范液區(qū)分如人等體積的20%蔗糖和0.2%溴酚藍(lán)待用。

(2)剝?nèi)ツz管下端膠布,倒出凝膠外表水,用電泳緩沖液洗濯凝膠外表三次,凝膠管內(nèi)加滿緩沖液,插人電泳槽中,上下槽加足電泳緩沖液,每支凝膠管加rna樣品10~ 20 μL(含RNA 50~ 100 μg)。

(三)電泳

接通電泳儀電源，上槽接負(fù)極，下槽接正極。末尾時電流應(yīng)小一些,以每支凝膠1~2mA為宜。待樣品進(jìn)人凝膠后添加至每支凝膠3mA,調(diào)至所需電流并堅(jiān)持。待溴酚藍(lán)遷移至距凝膠管下端2cm處封鎖電源中止電泳,取出凝膠管。

(四)染色及觀察

(1)用5mL注射器吸滿蒸餾水，安上穿刺針頭,針尖緊貼玻管壁,邊旋邊向凝膠管側(cè)壁注入水剝離凝膠。

(2)將凝膠放入染色液中染色1 h,再用6% HAc脫色,改換數(shù)次脫色液,直到背景明晰,普通需脫色24h。

(3)將凝膠泡在6%HAc中,取出后在紫外燈下觀察,比擬不異樣品的電泳區(qū)帶。

1、塑料制品類型：塑料成品

測試項(xiàng)目：感官、總遷移量-10%乙醇、總遷移量-4%乙酸、總遷移量-20%乙醇 、總遷移量-50%乙醇、 總遷移量-95%乙醇 、總遷移量-植物油替代物 、高錳酸鉀消耗量、重金屬（以Pb計(jì)） 脫色實(shí)驗(yàn)。

法規(guī)規(guī)范：GB 4806.7-2016 食品平安國度規(guī)范 食品接觸用塑料資料及制品。

2、塑料制品類型：PE 聚乙烯 樹脂原料

測試項(xiàng)目：感官、 枯燥失重、 灼燒殘?jiān)?正己烷提取物。

法規(guī)規(guī)范：GB 4806.6-2016 食品接觸用塑料樹脂。

3、塑料制品類型：12-十二烷二酸與1,6-己二胺的聚合物（聚十二烷二酰己二胺，聚酰胺612）（PA樹脂）

測試項(xiàng)目：感官、1,6-己二胺特定遷移。

法規(guī)規(guī)范：GB 4806.6-2016 食品接觸用塑料樹脂。

4、塑料制品類型：4,4'-亞異丙基二苯酚（雙酚A）與碳酰二氯或碳酸二苯酯的聚合物（PC樹脂）

測試項(xiàng)目：感官、 雙酚A遷移 、游離酚（蒸餾水回流，6h）、 水提取物 20%乙醇提取物、 4%乙酸提取物 、正己烷提取物、 高錳酸鉀消耗量、 重金屬（以鉛計(jì)）。

法規(guī)規(guī)范：GB 4806.6-2016 食品接觸用塑料樹脂。

5、塑料制品類型：苯乙烯均聚物及與丁二烯共聚物（PS樹脂）

測試項(xiàng)目：感官、 苯乙烯殘留、 乙苯殘留 、丁二烯特定遷移或丁二烯殘留、 枯燥失重(100℃，3h) 揮發(fā)物 、正己烷提取物。

法規(guī)規(guī)范：GB 4806.6-2016 食品接觸用塑料樹脂

6、塑料制品類型：丙烯腈-苯乙烯共聚物（AS樹脂）

測試項(xiàng)目：感官、 丙烯腈遷移。

法規(guī)規(guī)范：GB 4806.6-2016 食品接觸用塑料樹脂。

7、塑料制品類型：丙烯腈-丁二烯-苯乙烯（ABS樹脂）

測試項(xiàng)目：感官、 丙烯腈遷移 丁二烯遷移或殘留。

法規(guī)規(guī)范：GB 4806.6-2016 食品接觸用塑料樹脂。

8、塑料制品類型：聚丙烯，丙烯均聚物（PP樹脂）

測試項(xiàng)目：感官、 正己烷提取物（回流，2h）。

法規(guī)規(guī)范：GB 4806.6-2016 食品接觸用塑料樹脂。

9、塑料制品類型：聚對苯二甲酸乙二醇酯（PET樹脂）

測試項(xiàng)目：感官、 銻特定遷移 、以乙二醇計(jì)特定遷移總量 、以對苯二甲酸計(jì)特定遷移總量 、水提取物（回流，0.5h）、 65%乙醇提取物（回流，2h）、 4%乙酸提取物（回流，0.5h）、正己烷提取物（回流，1h）、 鉛（4%乙酸，回流0.5h）。

法規(guī)規(guī)范：GB 4806.6-2016 食品接觸用塑料樹脂

10、塑料制品類型：三聚氰胺甲醛樹脂 MF樹脂

測試項(xiàng)目：感官、 三聚氰胺特定遷移、 以甲醛計(jì)特定遷移總量。

法規(guī)規(guī)范：GB 4806.6-2016 食品接觸用塑料樹脂。

填充料就是在塑料成型加工進(jìn)程中參與無機(jī)填料或無機(jī)料，使這料制品的原料本錢降低到達(dá)增量目的，或使塑料制品的功用有清楚改動，聚丙烯無機(jī)填料有碳酸鈣、滑石粉等，價(jià)錢低，從而可大幅度地降低本錢，具有優(yōu)異的經(jīng)濟(jì)效益。聚丙烯，是由丙烯聚合而制得的一種熱塑性樹脂。聚丙烯具有較高的耐沖擊性，機(jī)械性質(zhì)強(qiáng)韌，抗多種無機(jī)溶劑和酸堿腐蝕。下面健明迪引見下關(guān)于聚丙烯填充料成分剖析方面知識。

聚丙烯填充料配方剖析：

聚丙烯用填充母料配方組成(質(zhì)量份)：聚丙烯(粉狀PP)，碳酸鈣，偶聯(lián)劑，硬脂酸鋅，抗氧化劑，輔佐抗氧劑。

聚丙烯填充料剖析范圍：

聚丙烯塑料，聚丙烯管，聚丙烯酰胺，聚丙烯膜，聚丙烯板，聚丙烯纖維，陰離子聚丙烯酰胺，聚丙烯管材，聚丙烯pp，聚丙烯料，改性聚丙烯。

聚丙烯填充料剖析項(xiàng)目：

殘留檢測，熔點(diǎn)檢測，熔融指數(shù)檢測，離子度檢測，含量檢測，食用級檢測，mg檢測，熱失重測試，灰分檢測，濃度檢測，功用檢測，分子量檢測，有毒有害檢測，氣息檢測，質(zhì)量檢測等。

聚丙烯填充料成分剖析規(guī)范:

GB/T 1632.3-2010塑料運(yùn)用毛細(xì)管黏度計(jì)測定聚合物稀溶液黏度第3局部：聚乙烯和聚丙烯

GB/T 2412-2008塑料聚丙烯(PP)和丙烯共聚物熱塑性塑料等規(guī)指數(shù)的測定

GB/T 2910.3-2009紡織品定量化學(xué)剖析第3局部：醋酯纖維與某些其他纖維的混合物(丙酮法)

GB 1886.259-2016食品平安規(guī)范食品添加劑蔗糖聚丙烯醚

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