食品微生物學(xué)檢驗是運用微生物學(xué)的實際與技術(shù),依照相應(yīng)的檢驗方法檢測食品中微生物的種類和數(shù)量,并依據(jù)國度微生物限量規(guī)范,評價食品衛(wèi)生、質(zhì)量與平安的一門運用性學(xué)科。GB 4789.1《食品平安國度規(guī)范食品微生物學(xué)檢驗總則》規(guī)則了食品微生物學(xué)檢驗基本準(zhǔn)繩和要求,適用于一切食品的微生物學(xué)檢驗。
一、實驗室基本要求
1.檢驗人員 微生物檢驗應(yīng)由具有相應(yīng)的微生物專業(yè)教育或培訓(xùn)閱歷,掌握包括慣例微生物檢測、無菌操作、消毒知識、生物防護(hù)等相關(guān)知識和專業(yè)技藝,并具有相應(yīng)檢驗資質(zhì)的人員實施檢驗。
2.環(huán)境與設(shè)備
食品微生物檢驗應(yīng)在潔凈區(qū)域停止。潔凈區(qū)域的級別應(yīng)依照GB 50687《食品工業(yè)潔凈用房修建技術(shù)規(guī)范》中“附錄A食品消費良好衛(wèi)生消費環(huán)境”中規(guī)則的“Ⅱ級背景下的Ⅰ級”,即傳統(tǒng)意義上10000級背景下的100級。病原微生物的分別鑒定任務(wù)應(yīng)在二級或以上生物平安實驗室停止,生物平安實驗室應(yīng)依照GB 50346《生物平安實驗室樹立技術(shù)規(guī)范》設(shè)計和施建,并契合《中華人民共和國生物平安法》(草案)、GB 19489《實驗室生物平安通用要求》等,以保證人員與環(huán)境的生物平安。
3.實驗設(shè)備
實驗室應(yīng)裝備滿足檢測任務(wù)要求的儀器設(shè)備,如天平、培育箱、水浴鍋、冰箱、均質(zhì)器、顯微鏡、生物平安柜等。其中培育箱的配置應(yīng)思索到用途、控溫范圍、控制精度和數(shù)量的要求。對結(jié)果有重要影響的儀器的關(guān)鍵量或值,如培育箱溫度及其平均性和動搖性等目的,應(yīng)歸入設(shè)備的校準(zhǔn)/檢定方案,并保證校準(zhǔn)/檢定設(shè)備的修正因子/誤差失掉及時更新和正確運用。
4.檢驗用品
無菌采樣容器、試管、平皿、錐形瓶等在運用前應(yīng)堅持清潔和/或無菌。無菌工用具和器皿應(yīng)有清楚標(biāo)識以與非無菌工用具和器皿加以區(qū)別。
5.培育基和試劑
培育基和試劑的制備和質(zhì)量要求依照GB 4789.28的規(guī)則執(zhí)行。
6.質(zhì)控菌株
實驗室必需保管有滿足實驗需求的規(guī)范菌種/菌株,除檢測方法中規(guī)則的菌種外,還應(yīng)包括運用于培育基(試劑)驗收/質(zhì)量控制、方法確認(rèn)/證明、陽性對照、陰性對照、人員培訓(xùn)考核和結(jié)果質(zhì)量的保證等所需的菌株。規(guī)范菌株應(yīng)可溯源至微生物菌種保藏專門機(jī)構(gòu)或?qū)I(yè)威望機(jī)構(gòu)。
二、樣品的采集
1.采樣準(zhǔn)繩
采樣是食品檢驗進(jìn)程中首要而且*重要的環(huán)節(jié),其對檢驗結(jié)果的有效性有著直接影響。因微生物散布的不平均性,采樣應(yīng)遵照隨機(jī)性和代表性準(zhǔn)繩,進(jìn)程遵照無菌操作順序,防止一切能夠的外來污染。
2采樣方案
依據(jù)檢驗?zāi)康?、食品特點、批量、檢驗方法、微生物的危害水平等確定采樣方案。采樣方案分為二級和三級采樣方案。二級采樣方案設(shè)有n(同一批次產(chǎn)品應(yīng)采集的樣品件數(shù))、c(*可允許超出m值的樣品數(shù))和m值[微生物目的可接受水平限量值(三級采樣方案)或*平安限量值(二級采樣方案)],三級采樣方案在二級采樣方案的基礎(chǔ)上設(shè)有M值(微生物目的的*平安限量值)。
關(guān)于沙門氏菌、單核細(xì)胞增生李斯特氏菌、大腸埃希氏菌O157:H7等危害水平高的微生物,GB 29921《食品平安國度規(guī)范食品中致病菌限量》規(guī)則均為二級采樣方案:n=5,c=0,m=0。關(guān)于金黃色葡萄球菌和副溶血性弧菌危害水平較低的微生物,GB 29921規(guī)則均為三級采樣方案,如水產(chǎn)制品中金黃色葡萄球菌和副溶血性弧菌限量規(guī)范均為:n=5,c=1,m= 100 CFU/g,M=1 000 CFU/g,含義是從一批產(chǎn)品中采集5個樣品,若5個樣品的檢驗結(jié)果均小于或等于m值(≤100 CFU/ g),則這種狀況是允許的;若≤1個樣品的結(jié)果(X)位于m值和M值之間(100 CFU/ g
3.采集樣品的貯存和運輸
采樣后應(yīng)在接近原有貯存溫度條件下貯存樣品,或采取必要措施防止樣品中微生物數(shù)量的變化,盡快將樣品送往實驗室檢驗,并在運輸進(jìn)程中堅持樣品完整。
三、檢驗
1.樣品處置
實驗室接到送檢樣品后仔細(xì)核對注銷,并按要求盡快檢驗,若不能及時檢驗,應(yīng)采取必要的措施,防止樣品中原有微生物因客觀條件的攪擾而發(fā)作變化。各類食品樣品處置應(yīng)按相關(guān)食品平安規(guī)范檢驗方法的規(guī)則執(zhí)行,GB 4789系列(17-25)共有包括肉與肉制品、乳與乳制品、蛋與蛋制品等9個食品類別的樣品處置方法。
2.樣品檢驗
按食品平安相關(guān)規(guī)范的規(guī)則停止檢驗,普通食品中微生物目的都采用GB 4789系列停止采樣、前處置和檢驗。但也有些產(chǎn)品類別在相應(yīng)食品平安國度規(guī)范中有明白要求,如GB 8537《食品平安國度規(guī)范飲用自然礦泉水》、GB 14963《食品平安國度規(guī)范蜂蜜》中的嗜滲酵母計數(shù)、GB 14934《食品平安國度規(guī)范消毒餐(飲)具》等,如GB 17400《食品平安國度規(guī)范方便面》微生物限量明白適用于面餅和調(diào)料的混合檢驗。
3.進(jìn)程質(zhì)量控制
實驗室應(yīng)依據(jù)需求設(shè)置陽性對照、陰性對照和空白對照,活期對檢驗進(jìn)程停止質(zhì)量控制。同時也應(yīng)活期對實驗人員停止技術(shù)考核,增強(qiáng)實驗室各要素風(fēng)險評價和進(jìn)程質(zhì)量控制。
四、記載與報告
實驗室應(yīng)依照檢驗方法中規(guī)則的要求,準(zhǔn)確、客觀、及時記載實驗現(xiàn)象并報告檢驗結(jié)果。日常抽檢微生物原始記載也有相應(yīng)的信息要求,如應(yīng)包括樣品編號、檢驗時間、檢測地點、檢測項目、檢測依據(jù)、檢測關(guān)鍵設(shè)備稱號和編號、關(guān)鍵培育基稱號(追溯至詳細(xì)品牌、批號及配制記載)、關(guān)鍵試劑信息、檢驗進(jìn)程中運用的規(guī)范菌株信息、樣品詳細(xì)取樣量及所運用稀釋液稱號、培育箱溫度及培育時間、詳細(xì)結(jié)果記載、空白、陰性和陽性對照結(jié)果記載等信息。
五、檢驗后樣品的處置
檢驗結(jié)果報告后,被檢樣品方能處置。檢出致病菌的樣品要經(jīng)過有害化處置。鑒于微生物散布的不平均性和靜態(tài)變化性,國際食品法典委員會公布的《食品微生物規(guī)范的制定和運用準(zhǔn)繩》規(guī)則,不合格批次不得經(jīng)過復(fù)檢否認(rèn)初次檢驗的結(jié)果。同理,GB 4789.1規(guī)則“檢驗結(jié)果報告后,剩余樣品和同批產(chǎn)品不停止微生物項目的復(fù)檢”,《食品平安抽樣檢驗管理方法》(總局15號令)也明白規(guī)則“檢驗結(jié)論為微生物目的不合格的食品不予復(fù)檢”。
崔學(xué)文 余曉琴 四川省食品藥品檢驗檢測院
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