實驗室霉菌檢測中罕見效果

霉菌：不是分類學上的名詞，而是一些絲狀真菌的通稱，屬真菌的一局部；其對人類具有雙重性，有利的方面是它可以用來釀造、工業(yè)發(fā)酵、抗生素和酶制劑的消費等，不利方面是它能惹起農副產品、食品、原料及器材的腐朽，也感染并惹起人類和動、植物的多種疾病，少數種類，如黃曲霉，能發(fā)生黃曲霉毒素，黃曲霉毒素是一種致癌物質，危害人、畜的安康和生命。因此，霉菌的檢測關于食品的平安性很重要。

食品中罕見的霉菌：毛霉屬、根霉屬、曲霉屬、青霉屬等。

檢測中的留意事項：

1、 取樣的代表性。

2、 取樣工具的無菌。空氣中霉菌的孢子含量很高，所以，取樣的工具、容器等要經過嚴厲的高壓滅菌。

3、 檢樣的方法。 (1)、由于霉菌易被攜帶，所以，檢樣時操作人員應盡量防止自身攜帶的能夠。 (2)、樣品的均質及充沛振搖。由于有些孢子是連成串的，故均質和振搖能使其充沛散開，同時，在各梯度延續(xù)稀釋時，也要用滅菌吸管重復吹吸幾次，使孢子充沛散開。

4、培育溫度和時間。培育溫度25-28℃培育，3天后觀察，需培育觀察一周。

霉菌檢驗中常用的培育基：孟加拉紅瓊脂、馬鈴薯葡萄糖瓊脂、察氏瓊脂、高鹽察氏瓊脂等。

5、檢樣中罕見的效果。

(1) 不同稀釋度計數結果相反；

(2) 不生長或生長很好連成片無法計數；

緣由： (1) 稀釋時未經重復振搖，吹吸，招致孢子未充沛散開，影響了計數的結果。 (2) 由于培育基不適宜，PH值高等，致使生長較慢。 (3) 觀察時間的掌握。真菌生長較慢，故需3d后才干觀察出結果。每天都要觀察結果。

微生物操作中罕見效果的討論與剖析

1、 劃線取得單個菌落的方法。劃不出單個菌落的緣由： (1) 平板上有過多的水分； (2) 劃線時接種環(huán)未經重復灼燒； (3) 多區(qū)劃線，三區(qū)或四區(qū)劃線。

2、 涂布和傾注的區(qū)別：涂布利于觀察，但由于涂布棒上會帶有大批的菌液，影響計數的準確性；涂布更為準確，但不利于觀察菌落的形狀。

3、 培育基配制時應留意的效果： (1) 滅菌溫度要嚴厲控制，依照要求滅菌，尤其含糖量較高的培育基溫度不應太高，過高會招致糖分焦化，影響質量； (2) 瓊脂培育基不能重復溶化。重復溶化會破壞培育基中的營養(yǎng)成分； (3) 培育基不能重復滅菌，重復滅菌也會招致營養(yǎng)成分的破壞； (4) 含瓊脂的培育基滅菌后，要搖勻。

4、 平板的保管：大少數平板如VRBA、DC、、尿素酶生化管、顯色系列等要避光高溫保管。

5、 產品的保管： (1) 干粉培育基：避光枯燥，結塊后不能運用。 (2) 亞碲酸鉀卵黃增菌液、50%卵黃乳液等：冷凍保管，運用時，要常溫解凍，防止水浴加熱。 (3) 抗生素類：冷藏保管，溫渡過高會招致靈敏度的下降。 (4) 兔血漿：冷藏保管大批的白色不會影響結果。

6、 觀察時間的掌握：按SN、GB等規(guī)范或培育基的運用說明所述時間停止觀察，時間過短或時間過長，單菌落的特征都不會很清楚。如單增李斯特氏菌顯色培育基，時間短單菌落看不到卵磷脂環(huán)，時間長綿羊李氏菌也會發(fā)生沉淀環(huán)。OXA、PALCAM的觀察也如此，時間過長，李氏菌使整個平板成黑色，不利于觀察單個菌落。

7、 添加劑的添加： (1) 溫度的掌握。卵黃和抗生素類添加的溫度都不應太高。 (2) 定量。過多會抑制一些目的菌，太少又招致雜菌的過度生長。

8、 培育溫度的掌握： (1) 真菌類。25-28℃培育 (2) 細菌類。李氏菌在增菌和生化中要求培育溫度在30℃左右。 (3) 其他普通在36℃左右

9、 接種方法：常用的方法主要有劃線、三點接種、穿刺接種、傾注接種、涂布接種、液體接種。

10、革蘭氏染色方法：染色時間的掌握、沖洗的方法。

11、生化實驗： (1) 接種的方法 (2) 氧化型和發(fā)酵型實驗操作 (3) 陽性菌種的對照 (4) 接種前的純化。挑取單個菌落停止一系列的生化。

12、關于殺菌的幾個概念： (1) 抑制：是在亞抑制劑量因子作用下招致微生物生長中止，但在移去這些因子后生長仍可以恢復的生物學現象。 (2 )死亡：在致死劑量因子的作用下或在亞致死劑量因子長時間的作用下，招致微生物生長才干不可逆喪失，即使移去這種因子后生長仍不能恢復的生物學現象。 (3) 防腐：在某些化學物質或物理因子作用下，能防止或抑制微生物生長的一種措施，它能防止食物糜爛或防止食物霉變。 (4) 消毒：應用某種方法殺死或滅活物質或物體中一切病原微生物的一種措施，它可以起到防止感染和傳達的作用。 (5) 滅菌：應用某種方法殺死物體中包括芽孢在內的一切病原微生物的一種措施。 (6) 化療：應用具有選擇毒性的化學物質，例磺胺、抗生素等對生物體外部被微生物感染的組織或病變細胞停止治療，以殺死組織內的病原微生物或病變細胞，但對無機體無毒害作用的治療措施。

來源：健明迪轉載于食品微生物檢測群眾號。 提示：文章、視頻、圖片等一切內容，僅用于學習交流，若有侵權內容及其他涉法內容，請及時聯絡刪除或修正，特此聲明！